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緩衝液
緩衝液を選択する際、pH とイオン強度は、対象生成物と不純物の分離だけでなく、生成物の収率にも影響を与える 2 つの重要な要素です。選択された pH は、対象生成物の等電点、安定性、溶解性によって決まり、分離された物質を交換可能なイオンにするだけでなく、その高い活性を維持します。イオン交換体の pK 値も考慮する必要があります。
溶出と再生
クロマトグラフィー媒体が使い果たされたら、溶出する必要があります。基本原理は、より活性なイオンまたは基によって対象生成物を脱着することです。吸着剤によって活性が異なります。したがって、クロマトグラフィー媒体からタンパク質を溶出するには、適切な溶出液を選択する必要があります。
イオン交換カラムはどのように機能しますか?
一定時間操作を行うと、樹脂層は飽和樹脂ゾーン、物質移動ゾーン、および新鮮樹脂ゾーンに分割されます。実行時間が長くなるにつれて、物質移動ゾーンは徐々に減少し、最終的に層の底部が物質移動ゾーンに貫通され、樹脂層全体が破損します。
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