CM セプライフ ®FFアガロースクロマトグラフィー樹脂

アガロースクロマトグラフィー樹脂  

CM セプライフ FF

CM セプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂製品プロファイル:

CM セプライフ ®FFクロマトグラフィー媒体は、サンレジン社が独自に開発した新しいタイプの高度架橋アガロースクロマトグラフィー媒体です。アガロースゲルろ過クロマトグラフィー媒体にカルボキシメチル基を結合させた弱陽イオンです。  イオン交換クロマトグラフィー媒体 流量が高く、背圧が低く、動荷重が高く、化学的安定性と機械的性質が良好で、非特異的吸着が低く、回収率が高く、スケールアップが容易で、生産時間を短縮し、生産効率を向上させることができます。広く使用されています。  イオン交換クロマトグラフィー精製  下流タンパク質の  核酸  そして  ペプチド  で  バイオ医薬品とバイオエンジニアリング 。

CM セプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂パラメータ:

CM セプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂試験手順:

1.カラムパッキング
標準操作手順に従って梱包作業を行います。各材料が作業温度にあることを確認し、梱包前にゲルを脱ガスする必要があります。
2.バランス
カラムをローディングバランス溶液のベッド容量の 2 ～ 5 倍で平衡化します。流出液の導電率と pH がローディングバッファーの導電率と pH と正確に同じであることを確認します。バランス溶液は、Tris、PBS などの低濃度バッファー溶液です。
3.読み込み
（１）サンプルはバランス溶液で調製し、濁ったサンプルはロードする前に遠心分離および濾過する必要があります。塩分濃度が高すぎるサンプルは処理後に調製されます。
（２）一般的には、目的生成物をカラムに結合させ、不純物を平衡化溶液で洗い流し、次に溶出液を選択して目的生成物を洗浄する。
（３）媒体が試料成分を吸着する程度は、試料の荷電特性、移動相のイオン強度、pH値に依存する。塩濃度が低いほど、媒体は試料成分をよりしっかりと吸着する。CMクロマトグラフィー媒体を使用する場合、推奨pH値は対象製品の等電点より1単位大きい。
4.溶出
塩濃度を上げるか、溶出の pH 値を上げます。一般的には塩濃度を上げるために使用されます。
5.再生
一般的には、まず高塩濃度緩衝液（1～2mol/L NaClを含む）で洗浄するか、カラム容量の10倍以上にpHを下げてから、タンパク質を結合させる際に平衡化溶液で平衡になるまで洗浄します。
再生時に洗い流すことのできない不活性化されたタンパク質や脂質がある場合は、CIP で除去できます。
6.定置洗浄
（１）イオン結合したタンパク質の場合、2M NaClのベッド容量の0.5～1倍で除去できる。
（２）沈殿したタンパク質、疎水結合したタンパク質または脂質の場合、まず1Mベッドボリュームの0.1M NaOHですすぎ、次にpHが中性になるまで平衡緩衝液で洗浄することができます。
（３）疎水結合の強いタンパク質や脂質の場合は、ベッド容量の4～10倍の70％エタノールまたは30％イソプロピルアルコールで洗浄します。有機溶媒の濃度は徐々に勾配状に増加することに注意してください。そうしないと、気泡が発生しやすくなります。
7.保管
密封し、乾燥した換気の良い清潔な場所で 4～30℃（保存液は 20% エタノール）で保存し、凍結しないでください。使用済みのカラムは 4～8℃、20% エタノール溶液で保存します。
8.交通
輸送中は日光、雨、強い圧力を避けてください。また、有毒有害物質と一緒に輸送することは固く禁じられています。

CM セプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂 注意事項:

（1）カラムの選択：理論上はカラムが十分に長ければ理想的な分解能が得られますが、カラム流量は圧力勾配に関係するため、カラムの長さが長くなると流量が遅くなり、ピークが広がり、分解能が低下します。カラムの直径が大きくなると、液体の流れの不均一性が増し、分解能が大幅に低下します。
（２）精製工程では溶出緩衝液のpHとイオン強度を厳密に管理する必要がある。サンプルとCMクロマトグラフィー媒体は、カラムクロマトグラフィーの前に溶出緩衝液で十分に平衡化されなければならない。
（３）設置した柱床は平らで溝や気泡がない状態にしてください。そうでない場合は再度設置する必要があります。
（４）溶出時の流速は厳密に制御し、速すぎないようにする必要がある。
（５）サンプルの量は少なく、濃度は高すぎないようにする。
（６）サンプル添加中および溶出プロセス全体を通してシリンダーが乾燥しないようにする。