SPセプライフ ®FFアガロースクロマトグラフィー樹脂

アガロースクロマトグラフィー樹脂  

SP セプライフ FF

SPセプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂製品プロファイル:

SPセプライフ ® FF  クロマトグラフィー樹脂  高度に架橋された新しい  アガロースクロマトグラフィー樹脂  サンレジンが独自に開発したスルホン酸系プロピルの一種で、  アガロースゲル濾過クロマトグラフィー樹脂 . 強力な陽イオン交換クロマトグラフィー樹脂は、高流量、低背圧、高動的負荷、良好な化学的安定性および機械的特性、低非特異的吸着、高回収率、便利なスケールアップ、生産時間の短縮、生産性の向上を備えています。  タンパク質のイオン交換分離 、  核酸  そして  ペプチド  下流の  バイオ医薬品とバイオエンジニアリング 。

SPセプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂パラメータ:

SPセプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂 テスト手順:

1.カラムパッキング
梱包は標準操作手順に従って行われます。各材料が動作温度にあること、およびゲルを梱包する前に脱ガスする必要があることを確認する必要があります。
2.均衡
カラムをローディング バランスの 2 ～ 5 倍のカラム容量で平衡化し、流出液の導電率と pH がローディング バッファーの導電率と pH と正確に同じであることを確認します。
バランス溶液は、NaOAC、PBS などの低濃度緩衝溶液です。一般的に使用されるバランス溶液は、0.1 mol/L 酢酸緩衝液、pH 5.0 です。
3.サンプルのロード
（１）サンプルをバランス溶液で調製し、濁ったサンプルは遠心分離、濾過して投入し、塩分濃度が高すぎるサンプルは処理して分注する。
（２）一般的には、目的生成物をカラムに結合し、平衡溶液で不純物を洗い流し、目的生成物を洗浄するための溶離液を選択する。
（３）媒体が試料成分を吸着する程度は、試料の荷電性、移動相のイオン強度、pHに依存します。塩濃度が低いほど、媒体は試料成分にしっかりと吸着します。SPクロマトグラフィー媒体を使用する場合、推奨pHは対象製品の等電点より1単位高い値です。
4.溶出
溶出は塩濃度を上げるか pH を上げることによって実行できますが、一般的には塩濃度を上げます。一般的に使用される溶出液 (溶液 B) は、0.1 mol/L 酢酸緩衝液 + 2 mol/L NaCl、pH 5.0 などです。
5.再生
一般的には、緩衝液を高塩濃度（1～2mol/L NaCl含有）で洗浄したり、pHを10倍以上に下げたりした後、結合したタンパク質の平衡溶液で洗浄してバランスをとります。
再生中に不活性化されたタンパク質や脂質が洗い流されない場合は、インプレース洗浄 (CIP) によって除去できます。
6.CIP
（１）イオン結合したタンパク質の場合、カラムベッド容量の0.5～1倍量の2M NaClで除去できる。
（２）沈殿したタンパク質、疎水結合したタンパク質または脂質の場合、最初にカラムベッド容量１Ｍの０．１Ｍ ＮａＯＨで洗浄し、次にｐＨが中性になるまで平衡緩衝液で洗浄します。
（３）疎水結合の強いタンパク質、脂質等の場合、ベッド容量の4～10倍の70％エタノールまたは30％イソプロパノールで洗浄します。有機溶媒の濃度は徐々に勾配状に増加することに注意してください。そうしないと、泡ができやすくなります。
7.保管
密封し、4〜30℃（保存液は20％エタノール＋0.2mol/L酢酸ナトリウム）で乾燥した、換気の良い、清潔な場所で保存し、凍結しないでください。
使用済みのカラムは4～8℃、20%エタノール溶液+0.2mol/L酢酸ナトリウムで保存します。

SPセプライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂 注意：

（1）カラムの選択：理論的には、カラムが十分に長ければ理想的な分解能が得られますが、カラムの流量は圧力勾配に関係するため、カラムの長さが長くなると流量が遅くなり、ピークが広くなり、分解能が低下します。カラムの直径が大きくなると、液体の流れの不均一性が増し、分解能が大幅に低下します。
（２）精製工程では、溶出緩衝液のpHとイオン強度を厳密に管理する必要がある。サンプル採取後にカラムクロマトグラフィーを実施し、SPクロマトグラフィー媒体を溶出緩衝液で十分に平衡化する必要がある。
（３）カラムベッドは平らで、溝や気泡がなく、そうでなければ再充填する必要があります。
（４）溶出プロセス中の流速は厳密に制御する必要があり、速すぎないようにする必要がある。
（５）サンプルの量は少なく、濃度は高すぎないようにする。
（６）充填中および溶出プロセス全体を通じて、シリンダー表面の乾燥が防止される。