mRNA 精製および単離用の新しいオリゴ dT 樹脂: シードされた磁気ビーズと噴射されたスチレン/DVB 樹脂に基づく新しい技術の探索

新しいサンレジン Seplife ®Oligo dT アフィニティー樹脂は、インビトロ転写 (IVT) 製造プロセスからの mRNA の精製および単離用に設計されています。特殊樹脂の製造におけるサンレジンの 20 年にわたる経験を活用し、シード膨潤によって非常に均一な粒子サイズを備えた 50 ミクロンのポリマー樹脂を製造する独自の技術を設計しました。この樹脂は、オリゴ dT20 で官能化された架橋ポリスチレンジビニルベンゼン樹脂です。この樹脂は、酵素やプラスミド DNA などの転写反応プロセスのコンポーネントから mRNA を効果的に捕捉します。

セライフ ® Oligo dT は、mRNA COVID-19 ワクチン、腫瘍ワクチン、エイズワクチン、希少疾患の治療と予防などのワクチンに使用されるさまざまな mRNA 構築物の選択性、容量、大規模な下流精製における需要の高まりを満たすように設計されています。その他の大きな病気。この樹脂は、単塩 (0.5M NaCl) および水ベースの精製ステップを使用して、ポリアデニル化 (ポリ A) テールを介して mRNA を選択的に捕捉することを可能にします。

Oligo dT の主な特徴は、粗転写ミックスからの簡単な mRNA 精製によるプラスミド DNA やその他の IVT コンポーネントの効果的な除去、さまざまな種類のカラムへの容易な適応によるワークフローの簡素化、および優れた拡張性を兼ね備えています。もちろん、この樹脂は効率的な CIP を実現するために、最大 65 ℃までの温度とアルカリに対して優れた安定性を示すように設計されています。

Sunresin が開発した独自の樹脂技術により、50kg の樹脂バッチを製造できるため、ばらつきのリスクが軽減され、GMP 条件と厳格な QC 管理を使用したクラス最高の製造能力が得られます。

樹脂微小球の表面を独自の技術で改質し、非特異的吸着を低減するために親水性を高めています。これは、長鎖スペーサーアームからなるリガンドの追加によって達成されるため、立体障害が軽減され、物質移動速度が増加し、高い動的結合が確保されます。ビーズの表面はポリ(dT)で官能化され、mRNAポリAテールとの塩基対形成を通じてmRNAを捕捉できるようになります。

このポスターでは、標準的な mRNA 精製条件下でのキャプチャとリリースを使用した、Oligo dT を使用した 1200nt mRNA の精製におけるアプリケーションを紹介します。さらに、樹脂にコーティングを施すことにより、プラスミド DNA やその他の転写ミックス成分を削減できます。

また、研究開発開発段階での精製と分離を容易にするために、オリゴ dT で官能化された新たに開発された磁性樹脂も紹介します。これらの磁気ビーズは、1 ～ 3 ミクロンの均一サイズのビーズを作成できる独自のシーディング技術によって作られたポリスチレンジビニルベンゼンのコア樹脂から始まります。次に、これらのビーズは Fe3O4 でコーティングされ、次に常磁性材料の放出からビーズを完全に保護するポリウレタン シェルで完全にコーティングされます。

これらの磁性粒子により、mRNA を簡単かつ迅速に分離できるため、新しい遺伝子治療の開発およびスクリーニングのプロセスが強化されます。