セライフ ®6FF ファストフロー アガロース クロマトグラフィー 樹脂
ファストフローアガロースクロマトグラフィー樹脂
セライフ6FF
セライフ ®6FF ファスト フロー アガロース クロマトグラフィー樹脂製品プロファイル:
セライフ ® 6FF 高速流アガロースクロマトグラフィー樹脂 Seplife での架橋によって形成されます ® 6B アガロースクロマトグラフィー媒体 。その化学的安定性と物理的特性は、高流量、高負荷、低比吸着により大幅に強化されます。回収率が高く、何度でも再利用可能です。に使用できます ゲル濾過クロマトグラフィー そして タンパク質の精製 、 核酸 そして ペプチド 下流側 バイオ医薬品とバイオエンジニアリング 。
セライフ ®6FF ファストフローアガロースクロマトグラフィー 樹脂パラメータ:
レジンコード | セライフ ® 6FF |
外観 | ホワイトスフィアビーズ |
粒径(脦录m) | 45×165 |
マトリックス | 6% 架橋アガロース |
流量(cm/h) | |
圧力(MPa) | 0.2 |
pH安定性 | 2~12(長期)、2~14(短期、CIP) |
応用 | 下流のタンパク質、核酸、ペプチド
バイオ医薬品とバイオエンジニアリング |
化学的安定性 | 水緩衝液中で安定:
2M NaOH; 70%エタノール、30%
イソプロパノール、30% アセトニトリル、1% SDS、6M グアニジン 塩酸塩、8M尿素。 |
除外制限 | 10000~4×10&164
165& グロブリン |
試験条件:
クロマトグラフィーカラム 16mm * 300mm; カラムベッドの高さ 15 cm。気温25℃。
移動相は 0.1 mol/L NaCl でした。 |
セライフ ®6FF ファストフローアガロースクロマトグラフィー 樹脂 テストの指示:
1.カラム充填
梱包は標準作業手順に従って行われます。各材料が動作温度にあること、およびゲルを梱包する前に脱気する必要があることを確認する必要があります。
2.平衡
2 ~ 5 カラム容量のローディングバランスでカラムを平衡化し、流出液の導電率と pH がローディングバッファーの導電率と pH と正確に同じであることを確認します。
3.サンプルのロード
(1)サンプルを緩衝液で調製し、濁ったサンプルを遠心分離、濾過してロードします。過剰な塩分を含むサンプルや濃度が低すぎるサンプルは、まず処理してからロードする必要があります。
(2)媒体による試料成分の分離は、成分の分子量に応じて行われ、まず分子量が流出します。
(3)充填量はカラム容積の1~2%程度であり、少ないほど分離性能が良くなります。
4.溶出
溶出は緩衝液を用いて行い、溶出中は流速と緩衝液組成を一定に保った。
5.再生
通常はバランスを整えるために緩衝液で洗浄され、再度使用できます。一部の不活化タンパク質または脂質は再生中に洗い流すことができず、インプレース洗浄 (CIP) によって除去できます。
6.CIP
(1) イオン結合タンパク質の場合、カラムベッドボリューム 0.5 ~ 1 の 2 M NaCl で除去できます。
(2) 沈殿したタンパク質、疎水的に結合したタンパク質または脂質の場合は、カラムベッドの 1 倍量の 0.1 M NaOH で除去できます。(3) 疎水性の強いタンパク質や脂質などの場合は、カラム容量の 4 ~ 10 倍の 70% エタノールまたは 30% イソプロパノールで洗浄できます。ただし、有機溶剤の濃度を徐々に増加させると、気泡が発生しやすくなるので注意が必要である。
洗浄が完了したら、pH とコンダクタンスが変わらなくなるまで、少なくとも 3 ベッドボリュームの平衡化バッファーでカラムを平衡化します。
7.保管
密封して 4 ~ 30 °C (保存液に 20% エタノールを含む) で乾燥し、換気し、清潔で、凍結していない状態で保存します。使用したカラムは 4Å、20% エタノール溶液に保存します。
セライフ ®6FF ファストフローアガロースクロマトグラフィー 樹脂 注意:
(1)ゲルろ過を使用する前に、サンプルをできるだけ濃縮する必要があります。
(2) サンプルは粒子のない清澄でなければなりません。
(3)最高の分解能を得るために、充填量はベッド容積の 5% を超えてはなりません。
(4) カラムクロマトグラフィーは、サンプルとクロマトグラフィー媒体を溶出バッファーで十分に平衡化した後に実行する必要があります。
(5) カラムベッドは平らで、溝や気泡がなくなければなりません。そうでない場合は、再度組み立てる必要があります。
(6)タンパク質の安定性と活性を保護するために、バッファー精製タンパク質が選択されます。
(7)タンパク質と培地間の非特異的なイオン相互作用を避けるために、最大 0.15 mol/L の NaCl をバッファーに添加できます。
(8)対象タンパク質の分子量に応じて、分離範囲の中央値に最も近い媒体を選択します。
(9) 溶出プロセス中の流速は厳密に制御する必要があり、速すぎないようにする必要があります。
(10)ローディング中および溶出プロセス全体の間、シリンダー表面の乾燥が防止されます。
(11)本製品は酸化剤との接触を避け、長時間空気にさらさないようにしてください。