SPセライフ ®FFアガロースクロマトグラフィー樹脂
アガロースクロマトグラフィー樹脂
SPセライフFF
SPセライフ ® FF アガロース クロマトグラフィー樹脂製品プロファイル:
SPセライフ ® FF クロマトグラフィー樹脂 新しい高度に架橋されたものです アガロースクロマトグラフィー樹脂 サンレジン社が独自に開発。スルホン酸系プロピルが結合した一種です。 アガロースゲル濾過クロマトグラフィー樹脂 。高流量、低背圧、高動的負荷、良好な化学的安定性と機械的特性、低非特異的吸着、高回収率、便利なスケールアップ、生産時間の短縮、生産性の向上を備えた強力な陽イオン交換クロマトグラフィー樹脂。広く使用されています タンパク質のイオン交換分離 、 核酸 そして ペプチド 下流側 バイオ医薬品とバイオエンジニアリング 。
SPセライフ ® FF アガロース クロマトグラフィー樹脂パラメータ:
| レジンコード | SPセライフ ® FF |
| 外観 | ホワイトスフィアビーズ |
| 粒径(脦录m) | 45×165 |
| マトリックス | セライフ6FF |
| 流量(cm/h) | |
| 圧力(MPa) | 0.3 |
| 耐熱性 | 121Å、水中で30分間 |
| pH安定性 | 4～13（長期）、3～14（短期、CIP） |
| 応用 | タンパク質、核酸、ペプチドの下流
バイオ医薬品とバイオエンジニアリングの |
| 化学的安定性 | 以下の液体中で安定です: すべての一般的な水性緩衝液。
1mol/L水酸化ナトリウム; 8 mol/L 尿素; 8mol/L塩酸グアニジン; 70%エタノール |
| 吸着量(mg/ml) | >55mg/ml リゾチーム/ml |
| イオン交換容量 | 0.18±0.25mmol /ml |
| 使用温度 | 4~40Å |
| 試験条件：
クロマトグラフィーカラム 16mm * 300mm; カラムベッドの高さ 15 cm。気温25℃。
移動相は 0.1 mol/L NaCl でした。 | |
SPセライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂 テストの指示:
1.カラム充填
梱包は標準作業手順に従って行われます。各材料が動作温度にあること、およびゲルを梱包する前に脱気する必要があることを確認する必要があります。
2.平衡
2 ～ 5 カラム容量のローディングバランスでカラムを平衡化し、流出液の導電率と pH がローディングバッファーの導電率と pH と正確に同じであることを確認します。
バランス溶液は、ＮａＯＡＣ、ＰＢＳなどの低濃度緩衝溶液である。一般的に使用されるバランス溶液は、0.1 mol/L 酢酸緩衝液、pH 5.0 です。
3.サンプルのロード
(1)サンプルをバランス溶液で調製し、濁ったサンプルを遠心分離、ろ過してロードします。塩分濃度が高すぎるサンプルは処理されて分注されます。
(2)一般に、目的生成物をカラム上で混合し、平衡溶液で不純物を洗い流し、溶離液を選択して目的生成物を洗浄します。
(3)媒体がサンプル成分を吸着する程度は、サンプルの帯電性質、移動相のイオン強度、pHによって異なります。塩分濃度が低く、媒体が試料成分にしっかりと吸着します。SP クロマトグラフィー媒体を使用する場合、推奨される pH はターゲット製品の等電点より 1 単位高いです。
4.溶出
溶出は、塩濃度を高めるか、pHを上げることにより行うことができるが、通常は塩濃度を高めることにより行うことができる。一般的に使用される溶離液 (溶液 B) など: 0.1 mol/L 酢酸緩衝液 + 2 mol/L NaCl、pH 5.0。
5.再生
通常、緩衝液は高塩濃度（1～2mol/L NaClを含む）で洗浄するか、pHを10倍以上下げてから、結合タンパク質の平衡溶液で洗浄してバランスをとります。
不活化されたタンパク質または脂質が再生中に洗い流されない場合は、インプレース洗浄 (CIP) によって除去できます。
6.CIP
(1) イオン結合で結合したタンパク質の場合、カラムベッドボリューム 0.5 ～ 1 の 2 M NaCl で除去できます。
(2) 沈殿したタンパク質、疎水的に結合したタンパク質または脂質の場合は、まずカラムベッド容量の 1 倍の 0.1 M NaOH で洗浄し、次に pH が中性になるまで平衡緩衝液で洗浄します。
(3) 疎水性の強いタンパク質、脂質などの場合は、ベッド容量の 4 ～ 10 倍の 70% エタノールまたは 30% イソプロパノールで洗浄します。有機溶媒の濃度は徐々に増加する勾配があるため、泡が発生しやすくなりますのでご注意ください。
7.保管
密封し、4〜30℃（保存液は20%エタノール+0.2mol/L酢酸ナトリウム）、乾燥した換気の良い清潔な場所で保管し、冷凍不可。
使用済みカラムは、20% エタノール溶液 + 0.2mol /L 酢酸ナトリウム、4 ～ 8 Åで保存されます。
SPセライフ ® FFアガロースクロマトグラフィー樹脂 注意：
(1)カラムの選択：理論的にはカラムが十分長ければ理想的な分離能が得られますが、カラム流量は圧力勾配に関係するため、カラム長が長くなり流量が遅くなるとピークが低くなります。幅が広くなり、解像度が下がります。カラムの直径が大きくなり、液体の流れの不均一性が増大し、分解能が大幅に低下します。
(2)精製プロセス中、溶出バッファーの pH とイオン強度を厳密に制御する必要があります。カラムクロマトグラフィーはサンプルの後に実行する必要があり、SP クロマトグラフィー媒体は溶出バッファーで完全に平衡化する必要があります。
(3) カラムベッドは溝や気泡がなく平らでなければなりません。そうでない場合は再充填する必要があります。
(4) 溶出プロセス中の流速は厳密に制御する必要があり、速すぎないようにする必要があります。
(5) サンプル量は少なく、濃度が高すぎないようにしてください。
(6)ローディング中および溶出プロセス全体において、シリンダー表面の乾燥が防止されます。
