CMセライフ ®FFアガロースクロマトグラフィー樹脂
アガロースクロマトグラフィー樹脂
CMセライフFF
CMセライフ ® FF アガロース クロマトグラフィー樹脂製品プロファイル:
CMセライフ ® FFクロマトグラフィー媒体は、サンレジンが独自に開発した新しいタイプの高架橋アガロースクロマトグラフィー媒体です。これは、カルボキシメチル基がアガロースゲル濾過クロマトグラフィー媒体に結合することによって形成される弱カチオンです。 イオン交換クロマトグラフィー媒体 。高流量、低背圧、高動的負荷、優れた化学的安定性と機械的特性、低非特異的吸着、高回収率を備え、スケールアップが容易で、生産時間を短縮し、生産効率を向上させることができます。で広く使用されています イオン交換クロマトグラフィー精製 下流のタンパク質の、 核酸 そして ペプチド で バイオ医薬品とバイオエンジニアリング 。
CMセライフ ® FF アガロース クロマトグラフィー樹脂パラメータ:
| レジンコード | CMセライフ ® FF |
| 外観 | ホワイトスフィアビーズ |
| 粒子サイズ（ 脦录 メートル ) | 45～165 |
| マトリックス | セライフ6FF |
| 流量(cm/h) | |
| 圧力(MPa) | 0.3 |
| 耐熱性 | 121Å、水中で30分間 |
| pH安定性 | 4～13（長期）、3～14（短期、CIP） |
| 応用 | タンパク質、核酸、ペプチドの下流
バイオ医薬品とバイオエンジニアリングの |
| 化学的安定性 | 以下の液体中で安定です: すべての一般的な水性緩衝液。1mol/L水酸化ナトリウム; 8 mol/L 尿素; 8mol/L塩酸グアニジン;
70%エタノール |
| 吸着量(mg/ml) | 60mg/ml リゾチーム/ml |
| イオン交換容量 | 0.09±0.13mmol /ml |
| 使用温度 | 4~40Å |
| 試験条件：
クロマトグラフィーカラム 16mm * 300mm; カラムベッドの高さ 15 cm。気温25℃。
移動相は 0.1 mol/L NaCl でした。 | |
CMセライフ ® FF アガロース クロマトグラフィー樹脂のテスト手順:
1.カラム充填
標準作業手順に従って梱包作業を行います。各材料が作業温度にあることを確認する必要があり、ゲルは梱包前に脱気する必要があります。
2.バランス
ベッドボリュームの 2 ～ 5 倍のローディングバランス溶液でカラムを平衡化します。流出液の導電率と pH がローディング バッファーの導電率と pH と正確に同じであることを確認してください。バランス溶液は、Tris、PBS などの低濃度の緩衝液です。
3.ロード
(1) サンプルはバランス溶液で調製されており、濁ったサンプルはロードする前に遠心分離し、ろ過する必要があります。塩分濃度が高すぎるサンプルは処理後に調製されます。
(2)通常は目的物をカラムに結合させ、平衡化液で不純物を洗い流した後、溶離液を選択して目的物を洗浄します。
(3)媒体が試料成分を吸着する程度は、試料の帯電特性、移動相のイオン強度、pH値などに依存します。塩分濃度が低く、試料成分をより強固に吸着します。CM クロマトグラフィー媒体を使用する場合、推奨される pH 値は、ターゲット製品の等電点より 1 単位大きい値です。
4.溶出
塩濃度を上げるか、溶出の pH 値を上げます。通常、塩濃度を上げるために使用されます。
5.再生
通常、タンパク質結合時には高塩濃度緩衝液（1～2mol/L NaCl含有）で洗浄するか、pHをカラム容量の10倍以上に下げてから、平衡溶液で平衡になるまで洗浄します。
再生中に洗い流せない不活化タンパク質や脂質がある場合は、CIP で除去できます。
6.その場での清掃
(1)イオン結合で結合したタンパク質の場合、ベッドボリュームの0.5～1倍の2M NaClで除去できます。
(2) 沈殿したタンパク質、疎水的に結合したタンパク質または脂質の場合は、まず 1M ベッドボリュームの 0.1M NaOH で洗浄し、次に pH が中性になるまで平衡化緩衝液で洗浄します。
(3)疎水結合の強いタンパク質や脂質の場合は、ベッド容量の4～10倍の70%エタノールまたは30%イソプロピルアルコールで洗浄してください。なお、有機溶剤の濃度は徐々に濃度勾配を付けて増加させないと気泡が発生しやすいので注意してください。
7.保管
乾燥した、換気された、清潔な場所で 4 ～ 30 È (保存液は 20% エタノール) で密封して保管し、冷凍不可。使用したカラムは 4 ～ 8Å、20% エタノール溶液で保存します。
8.交通機関
輸送中は日光、雨、強い圧力を避けてください。有毒物質や有害物質と一緒に輸送することは固く禁じられています。
CMセライフ ® FF アガロース クロマトグラフィー レジン 注意が必要な事項:
(1)カラムの選択：理論的にはカラムが十分長ければ理想的な分離能が得られますが、カラム流量は圧力勾配に関係するため、カラム長を長くすると流量が遅くなり、ピークが低下します。広がり、解像度が低下します。カラム径が大きくなるため、液の流れのムラが大きくなり、分解能が大幅に低下します。あ
(2)精製プロセス中、溶出バッファーの pH とイオン強度を厳密に制御する必要があります。カラムクロマトグラフィーの前に、サンプルと CM クロマトグラフィー媒体を溶出バッファーで完全に平衡化する必要があります。あ
(3) 取り付けられたカラムベッドは平らで、チャネルや気泡がなくなければなりません。そうでない場合は、再度取り付ける必要があります。
(4)溶出中の流速は厳密に制御し、速すぎないように注意してください。
(5) サンプル量は少なく、濃度が高すぎないようにしてください。
(6) サンプルの添加中および溶出プロセス全体の間、シリンダーが乾燥しないようにしてください。
