緩衝液

pH はイオン交換クロマトグラフィーの操作において重要な要素であり、pH の安定化と変更は通常緩衝液によって実現されるため、緩衝液の選択は分離に影響を与える重要な要素です。

緩衝液を選択する場合、pH とイオン強度は、目的生成物を不純物から分離するだけでなく、生成物の収率にも影響を与える 2 つの重要な要素です。選択される pH は、分離された物質を交換可能なイオンにするだけでなく、その高い活性を維持するために、目的生成物の等電点、安定性、溶解度に依存します。イオン交換体の pK 値も考慮する必要があります。

バッファ自体も課金されているので、  イオン交換クロマトグラフィー媒体 。この組み合わせは 2 種類の干渉を引き起こし、一方ではバッファーの濃度を低下させ、それによってバッファリング容量を減少させます。一方、分離媒体と交換されて、媒体の交換能力をめぐってタンパク質と競合します。したがって、陰イオン交換クロマトグラフィー媒体を使用する場合は、リン酸塩などの負に帯電した緩衝液の使用を避けてください。陽イオン交換クロマトグラフィー媒体を使用する場合は、Tris などの正に帯電したバッファーの使用を避けてください。

分離媒体の種類が異なるため、最初のプロセスは若干異なります。通常の状況下では、陰イオン交換クロマトグラフィー媒体を使用する場合、初期緩衝液は標的タンパク質の等電点より pH 0.5 ～ 1 高くなります。陽イオン交換層を使用する 媒体を分析する場合、開始緩衝液は標的タンパク質の等電点より 0.5 ～ 1 pH 低くなります。