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Seplife®6FF

製品説明

高速フローアガロースクロマトグラフィー樹脂

Seplife 6FF

製品プロファイル:
Seplife®6FFファストフローアガロースクロマトグラフィー樹脂Seplife®6Bの架橋により形成されますアガロースクロマトグラフィー培地。その化学的安定性と物理的特性は、高流量、高負荷、低比吸着で大幅に向上します。回収率が高く、何度でも再利用できます。それはのために使用することができますゲルろ過クロマトグラフィーそしてタンパク質の精製,核酸そしてペプチドの下流バイオ医薬品とバイオエンジニアリング.

20200804083702

樹脂パラメータ:

樹脂コード Seplife®6FF
外観 ホワイトスフィアビーズ
粒度(μm) 45〜165
マトリックス 6%架橋アガロース
流量(cm / h) <300
圧力(MPa) 0.2
pHの安定性 2〜12(長期)、2〜14(短期、CIP)
応用 下流のタンパク質、核酸、ペプチド
バイオ医薬品とバイオエンジニアリング
化学的安定性 水緩衝液中で安定: 2M NaOH; 70%エタノール、30%
イソプロパノール、30%アセトニトリル、1%SDS、6Mグアニジン
塩酸塩、8M尿素。
除外制限 10000〜4×106 グロブリン
試験条件: クロマトグラフィーカラム16mm * 300mm;カラムベッドの高さ15cm;温度25℃;
移動相は0.1mol / LNaClでした。


テスト手順:
1.カラムパッキング
梱包は、標準の操作手順に従って実行されます。各材料が動作温度にあり、充填する前にゲルを脱気する必要があることを確認する必要があります。
2.均衡
カラムを2〜5カラム容量のローディングバランスで平衡化し、溶出液の導電率とpHがローディングバッファーの導電率とpHと正確に同じであることを確認します。
3.サンプルの読み込み
(1)緩衝液でサンプルを調製し、濁ったサンプルを遠心分離し、ろ過してロードします。塩分が多すぎて濃度が低すぎるサンプルは、最初に処理してからロードする必要があります。
(2)培地によるサンプル成分の分離は、成分の分子量に応じて行われ、最初に分子量が流出します。
(3)ローディングボリュームはカラムボリュームの約1〜2%であり、小さいほど分離性能が向上します。
4.溶出
溶出は緩衝液を用いて行い、溶出中は流速と緩衝液の組成を一定に保った。
5.再生
通常、バランスを取るためにバッファーで洗浄し、再度使用できます。一部の不活化タンパク質または脂質は、再生中に洗い流すことができず、定置洗浄(CIP)によって除去できます。
6.CIP
(1)イオン結合タンパク質の場合、0.5〜1カラムベッド容量の2 MNaClで除去できます。
(2)沈殿したタンパク質、疎水性に結合したタンパク質または脂質の場合、0.1 MNaOHの1カラムベッドボリュームで除去できます。 (3)疎水性に強く結合したタンパク質、脂質などの場合、4〜10カラム容量の70%エタノールまたは30%イソプロパノールで洗浄できます。ただし、有機溶媒の濃度は勾配的に徐々に増加し、そうでないと気泡が発生しやすいことに注意する必要があります。
洗浄が完了したら、pHとコンダクタンスが変化しないまで、少なくとも3ベッドボリュームの平衡化バッファーでカラムを平衡化します。
7.ストレージ
密封して4〜30℃(保存液中20%エタノール)で保存し、乾燥、換気、清潔、冷凍なし。使用済みカラムは4℃、20%エタノール溶液で保存します。


注意:
(1)ゲルろ過を使用する前に、サンプル量をできるだけ濃縮する必要があります。
(2)サンプルは粒子なしで浄化する必要があります。
(3)最高の解像度を得るために、積載量はベッド容量の5%を超えてはなりません。
(4)カラムクロマトグラフィーはサンプルの後に実施し、クロマトグラフィー媒体は溶出バッファーと完全に平衡化する必要があります。
(5)カラムベッドは平らで、溝や気泡がないことを確認してください。そうでない場合は、組み立て直してください。
(6)タンパク質の安定性と活性を保護するために、バッファー精製タンパク質が選択されます。
(7)タンパク質と培地間の非特異的なイオン相互作用を回避するために、最大0.15 mol / LのNaClをバッファーに添加できます。
(8)標的タンパク質の分子量に応じて、分離範囲の中央値に最も近い培地が選択されます。
(9)流速は、溶出プロセス中に厳密に制御する必要があり、速すぎないようにする必要があります。
(10)ローディングおよび溶出プロセス全体で、シリンダー表面の乾燥が防止されます。
(11)この製品は、酸化剤との接触を避け、空気への長時間の暴露を避ける必要があります。



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