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SPSeplife®FF

アガロースマトリックス、SPグループ、高速フロー、SPセファロースFFと同等
製品説明

アガロースクロマトグラフィー樹脂

SP seplife FF

製品プロファイル:
SPseplife®FFクロマトグラフィー樹脂新しい高度に架橋されたアガロースクロマトグラフィー樹脂Sunresinが独自に開発しました。スルホン酸系プロピルの一種です。アガロースゲルろ過クロマトグラフィー樹脂。高流量、低背圧、高動的負荷、優れた化学的安定性と機械的特性、低非特異的吸着、高回収率、便利なスケールアップ、生産時間の短縮、生産性の向上を備えた強陽イオン交換クロマトグラフィー樹脂。それは広く使用されていますタンパク質のイオン交換分離,核酸そしてペプチドの下流バイオ医薬品とバイオエンジニアリング.

樹脂パラメータ:

樹脂コードSPSeplife®FF
外観ホワイトスフィアビーズ
粒度(μm)45〜165
マトリックスSeplife 6FF
流量(cm / h)<750
圧力(MPa)0.3
耐熱性121℃、水中で30分間
pHの安定性4〜13(長期)、3〜14(短期、CIP)
応用下流のタンパク質、核酸、ペプチド
バイオ医薬品とバイオエンジニアリングの
化学的安定性次の液体で安定:すべての一般的な水性緩衝液。
1 mol / L水酸化ナトリウム; 8 mol / L尿素; 8 mol / L塩酸グアニジン; 70%エタノール
吸着(mg / ml)> 55mg / mlリゾチーム/ ml
イオン交換容量0.18〜0.25mmol / ml
動作温度4〜40℃
試験条件: クロマトグラフィーカラム16mm * 300mm;カラムベッドの高さ15cm;温度25℃;
移動相は0.1mol / LNaClでした。


テスト手順:
1.カラムパッキング
梱包は、標準の操作手順に従って実行されます。各材料が動作温度にあり、充填する前にゲルを脱気する必要があることを確認する必要があります。
2.均衡
カラムを2〜5カラム容量のローディングバランスで平衡化し、溶出液の導電率とpHがローディングバッファーの導電率とpHと正確に同じであることを確認します。
平衡塩類溶液は、NaOAC、PBSなどの低濃度緩衝液である。一般的に使用される平衡塩類溶液は、0.1 mol / L酢酸緩衝液、pH5.0です。
3.サンプルの読み込み
(1)平衡塩類溶液でサンプルを調製し、濁ったサンプルを遠心分離し、ろ過してロードします。塩濃度が高すぎるサンプルは処理されてから分注されます。
(2)一般に、対象生成物をカラム上で混合し、不純物を平衡溶液で洗い流し、溶離液を選択して対象生成物を洗浄します。
(3)媒体がサンプル成分を吸着する程度は、サンプルの帯電性、移動相のイオン強度、およびpHに依存します。塩濃度が低く、培地がサンプル成分にしっかりと吸着します。 SPクロマトグラフィー媒体を使用する場合、推奨されるpHはターゲット製品の等電点より1単位上です。
4.溶出
溶出は、塩濃度を上げるか、pHを上げ、一般的に塩濃度を上げることで行うことができます。一般的に使用される溶離液(溶液B):0.1 mol / L酢酸緩衝液+2 mol / L NaCl、pH5.0。
5.再生
一般的に、緩衝液は高塩濃度(1〜2mol / LのNaClを含む)で洗浄するか、pHを10倍以上下げてから、結合したタンパク質の平衡溶液で洗浄してバランスを取ります。
不活化されたタンパク質または脂質が再生中に洗い流されない場合は、定置洗浄(CIP)によって除去できます。
6.CIP
(1)イオン結合で結合したタンパク質の場合、0.5〜1カラムベッド容量の2 MNaClで除去できます。
(2)沈殿したタンパク質、疎水的に結合したタンパク質、または脂質の場合、最初に1カラムベッド容量の0.1 M NaOHで洗浄し、次にpHが中性になるまで平衡緩衝液で洗浄できます。
(3)疎水性に強く結合したタンパク質、脂質などの場合は、ベッドボリュームの70%エタノールまたは30%イソプロパノールの4〜10倍で洗浄します。有機溶媒の濃度が徐々に増加することに注意してください。そうしないと、気泡が発生しやすくなります。
7.ストレージ
密封して4〜30℃で保存し(保存液は20%エタノール+ 0.2mol / L酢酸ナトリウム)、乾燥、換気、清潔な場所、冷凍できません。
使用済みカラムは4〜8℃、20%エタノール溶液+ 0.2mol / L酢酸ナトリウムで保存します。


注意:
(1)カラム選択:理論的には、カラムが十分に長い限り理想的な分離能が得られますが、カラム流量は圧力勾配に関係しているため、カラム長が長くなり流量が遅くなり、ピークはより広く、解像度が低下します。カラムの直径が大きくなると、液体の流れの不均一性が増し、分離能が大幅に低下します。
(2)溶出バッファーのpHとイオン強度は、精製プロセス中に厳密に制御する必要があります。カラムクロマトグラフィーはサンプルの後に実行する必要があり、SPクロマトグラフィー培地は溶出バッファーで完全に平衡化する必要があります。
(3)カラムベッドは平らで、溝や気泡がない必要があります。そうでない場合は、再梱包する必要があります。
(4)流速は、溶出プロセス中に厳密に制御する必要があり、速すぎないようにする必要があります。
(5)サンプルの量は少なく、濃度は高すぎないようにしてください。
(6)ローディングおよび溶出プロセス全体で、シリンダー表面の乾燥を防ぎます。





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